(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211138463.5 (22)申请日 2022.09.19 (71)申请人 厦门隆励工贸有限公司 地址 361100 福建省厦门市同安区洪塘镇 新学二路185号 (72)发明人 况应谷　冶双德　王建生　肖学奎　 (51)Int.Cl. C12P 21/04(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/125(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/10(2006.01) (54)发明名称 一种伊枯草菌素培养基及应用其的培养方 法 (57)摘要 本申请涉及培养基的技术领域， 具体公开了 一种伊枯草菌素培养基及应用其的培养方法。 一 种伊枯草菌素培养基， 包括以下重量份物质： 0.5‑3份甜菜渣、 1 ‑4份葡萄糖、 0.5 ‑4份玉米淀 粉、 1‑5份玉米芯粉、 1 ‑3份豆粕粉、 1 ‑3份酵母浸 粉、 1‑1.5份甘油、 0.1 ‑0.5份磷酸氢二钾、 0.1 ‑ 0.3份磷酸二氢钾、 0.01 ‑0.05份硫酸锰、 0.05 ‑ 0.3份消泡剂； 应用其的培养方法为： S1、 菌种预 处理； S2、 发酵培养。 本申请生成的培养基可用于 伊枯草菌 素的培养， 其具有提高伊枯草菌素产量 的优点； 另外， 本申请的制备方法具有操作简便、 促进菌种生长且不 易脏污、 染菌的优点。 权利要求书1页 说明书10页 CN 115287316 A 2022.11.04 CN 115287316 A 1.一种伊枯草菌素培养基， 其特征在于， 包括以下重量份物质： 0.5 ‑3份甜菜渣、 1 ‑4份 葡萄糖、 0.5 ‑4份玉米淀粉、 1 ‑5份玉米芯粉、 1 ‑3份豆粕粉、 1 ‑3份酵母浸粉、 1 ‑1.5份甘油、 0.1‑0.5份磷酸氢二钾、 0.1 ‑0.3份磷酸 二氢钾 、 0.01‑0.05份硫酸锰  、 0.05‑0.3份消泡剂。 2.根据权利要求1所述的一种伊枯草菌素培养基， 其特征在于： 还包括氨基酸补加剂， 所述氨基酸补加剂包括天冬氨酸、 谷氨酰胺、 脯氨酸， 所述氨基酸补加剂外包裹有外壳材 料。 3.根据权利要求2所述的一种伊枯草菌素培养基， 其特征在于： 所述外壳材料包括脂质 体， 所述脂质体为空心结构。 4.根据权利要求3所述的一种伊枯草菌素培养基， 其特征在于： 所述外壳材料还包括硫 酸钙， 所述脂质体与硫酸钙的质量比为1:1 ‑2。 5.根据权利要求4所述的一种伊枯草菌素培养基， 其特征在于， 所述氨基酸补加剂的制 备方法： 分别称量以下重量份物质， 5 ‑10份脂质体、 5 ‑6份天冬氨酸、 0.9 ‑1.5份谷氨酰胺、 0.5‑0.7份脯氨酸、 4 ‑6份络合剂、 5 ‑20份硫酸钙和3 ‑5份粘结剂， 取脂质体进行纯化、 破膜、 稀释， 得到脂质体溶液， 将天冬氨 酸、 谷氨酰胺和脯氨 酸添加至脂质体溶液中， 搅拌混合， 加 入络合剂， 继续搅拌混合， 过滤， 干燥， 得到中间产物， 将中间产物、 粘结剂、 硫酸钙混合， 搅 拌混合， 干燥， 得到氨基酸补加剂； 所述氨基酸补加剂为核 ‑双壳结构。 6.根据权利要求5所述的一种伊枯草菌素培养基， 其特征在于： 所述络合剂包括透 明质 酸钠、 酵母发酵 液、 酵母浸提物中的至少两种； 所述粘结剂包括透明质酸钠。 7.应用权利要求1 ‑6任一项所述的一种伊枯草菌素培养基的培养方法， 其特征在于， 包 括以下制备步骤： S1、 菌种预处理： 取菌种置于活化培养基上培养， 得到活化菌种， 挑取活化菌种接种于 种子培养基中进行培 养， 得到经 预处理的菌种； S2、 发酵培养： 将经预处理的菌种接种至培养基中， 发酵处理， 离心分离， 保留上清液， 冷冻保存， 得到伊 枯草菌素。 8.根据权利要求7所述的一种应用伊枯草菌素培养基的培养方法， 其特征在于， 在步骤 S2中， 所述发酵处理包括以下步骤： 于180 ‑220r/min的转速下振荡处理， 振荡处理后， 进行 静置处理。 9.根据权利要求8所述的一种应用伊枯草菌素培养基的培养方法， 其特征在于： 所述振 荡处理的时间为2 ‑3d， 所述静置处 理的时间为3 ‑4d。 10.根据权利要求8所述的一种应用伊枯草菌素培养基的培养方法， 其特征在于： 所述 菌种包括枯草芽孢杆菌、 液化淀粉芽孢杆菌、 地衣芽孢杆菌、 坚强芽孢杆菌以及上述菌株的 遗传改良菌中的任意 一种。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115287316 A 2一种伊枯草菌素培养基 及应用其的培养方 法 技术领域 [0001]本申请涉及培养基的技术领域， 尤其是涉及一种伊枯草菌素培养基及应用其的培 养方法。 背景技术 [0002]目前， 饲料安全受到广泛关注， 饲料的质量直接关系着养殖产品的质量。 之前， 通 常在饲料中添加大量抗生素以提高饲料 的抗菌性、 降低食用饲料 的禽畜生病的概率。 随着 人们对食品安全和健康的重视， 食用添加抗生素饲料的禽畜的存在一些弊端， 其一， 长时间 食用添加抗生素饲料的禽畜体内的致病细菌等耐药性提高， 高耐药性的细菌等较易引起畜 禽内源感染和二重感染， 使畜禽免疫力下降， 其 二， 抗生素较易在畜禽产品和环境中残留。 [0003]为了在维持饲料具有抗菌效果的同时， 改善饲料的安全性， 近年来， 人们采用在饲 料中添加抗菌肽以安全、 高效提高饲料的抗菌效果。 抗菌肽是一种安全的抗菌材料， 包括昆 虫抗菌肽、 哺乳动物抗菌肽、 两栖动物抗菌肽、 鱼类、 软体动物、 甲壳类动物来源的抗菌肽、 植物抗菌肽、 细菌抗菌肽， 在饲料中添加的抗菌肽为细菌抗菌肽， 如杆菌肽、 短杆菌肽S、 多 黏菌素E、 乳链菌肽等。 [0004]针对上述相关技术， 近年来， 人们选用常用于植物抗菌的抗菌肽： 伊枯草菌素作为 抗菌肽应用于禽畜饲料中， 但目前普通的培养基培养得到的伊枯草菌素 的数量较少， 发明 人认为亟需找到提高伊 枯草菌素产量的方法。 发明内容 [0005]为了得到一种高效、 安全且能够应用于禽畜饲料的抗菌肽并找到提高该抗菌肽的 产量的方法， 本申请提供一种应用于无抗 生素饲料的抗菌肽、 培 养基及培 养方法。 [0006]第一方面， 本申请提供一种伊 枯草菌素培 养基， 采用如下的技 术方案： 一种伊枯草菌素培养基， 包括以下重量份物质： 0.5 ‑3份甜菜渣、 1 ‑4份葡萄糖、 0.5‑4份玉米淀粉、 1 ‑5份玉米芯粉、 1 ‑3份豆粕粉、 1 ‑3份酵母浸粉、 1 ‑1.5份甘油、 0.1 ‑0.5份 磷酸氢二钾、 0.1 ‑0.3份磷酸 二氢钾 、 0.01‑0.05份硫酸锰  、 0.05‑0.3份消泡剂。 [0007]通过采用上述技术方案， 本申请技术方案中优选甜菜渣、 葡萄糖、 甘油、 玉米淀粉 以及玉米芯粉配合作为碳源， 通过有机碳源和无机碳源的配合， 有效为菌种提供能源， 并且 玉米芯粉在碳源中能够起到一定的酶诱导效果， 能够促进伊枯草菌素的生长。 其次， 优选豆 粕粉和酵母浸粉配合作为氮源， 豆粕粉为迟效氮源， 通过迟效氮源的加入， 控制菌种的生长 速度， 使得菌种产生较多的伊枯草菌素， 提高伊枯草菌素的产量， 而酵母浸粉则为速效氮 源， 持续且稳定为菌种提供氮源， 有效改善伊 枯草菌素的产量。 [0008]同时， 本申请技术方案中优化了豆粕粉在培养基中的含量， 适宜的豆粕粉含量， 使 得培养基中的水分适宜， 有利于培养基中氧气的传递， 改善菌种的呼吸速率， 提高伊枯草菌 素的产量。 同时， 优化了酵母浸粉的含量， 适宜的酵母浸粉稳定为菌种提供氮源， 提高伊枯 草菌素的产量。说　明　书 1/10 页 3 CN 115287316 A 3