(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210619664.0 (22)申请日 2022.06.02 (83)生物保 藏信息 CGMCC No.1.12734 2020.07.20 CGMCC No.15410 2018.0 3.05 CGMCC No.10452 2015.01.27 CGMCC No.15409 2018.0 3.05 CGMCC No.1.1273 5 2020.07.20 CGMCC No.16923 2018.12.10 CGMCC No.12915 2016.08.2 9 CGMCC No.10453 2015.01.27 (71)申请人 微康益生菌 （苏州)股份有限公司 地址 215200 江苏省苏州市吴江经济技 术 开发区龙桥路10 33号 (72)发明人 方曙光　董瑶　盖忠辉　朱建国　(74)专利代理 机构 北京品源专利代理有限公司 11332 专利代理师 边人洲 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12R 1/225(2006.01) C12R 1/245(2006.01) C12R 1/23(2006.01) C12R 1/25(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培 养基及其应用 (57)摘要 本发明提供一种促进乳杆菌和双歧杆菌协 同增殖的培养基及其应用， 所述培养基按质量百 分含量计包括如下组分组成： 益生元组合物2 ‑ 5%、 蛋白胨0.5 ‑5%、 牛肉膏0.5 ‑2%、 酵母浸膏0.1 ‑ 2%、 柠檬酸氢二铵0.05 ‑1%、 K2HPO40.05‑1%、 MgSO40.01‑1%、 MnSO40.01‑1%、 吐温‑80 0.05‑ 1%、L‑半胱氨酸 盐酸盐0.05 ‑1%； 所述益生元组合 物包括质量比为(1 ‑2):(1‑2):(0.1 ‑1)的水苏 糖、 低聚甘露糖和低聚木糖。 本发明复合益生元 培养基能够明显提高乳杆菌和双歧杆菌的增殖 和产酸能力， 高密度培养确保肠道常见有益菌的 活性和功能， 使其能够有效定植肠道。 权利要求书2页 说明书32页 CN 114854643 A 2022.08.05 CN 114854643 A 1.一种促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养基， 其特征在于， 所述培养基按质量百 分含量计包括如下组分： 益生元组合物2 ‑5%、 蛋白胨0.5 ‑5%、 牛肉膏0.5 ‑2%、 酵母浸膏0.1 ‑ 2%、 柠檬酸氢二铵0.05 ‑1%、 K2HPO4 0.05‑1%、 MgSO4 0.01‑1%、 MnSO4 0.01‑1%、 吐温‑80 0.05‑ 1%、L‑半胱氨酸盐酸盐0.0 5‑1%； 其中， 所述益生元组合物包括质量比为(1 ‑2):(1‑2):(0.1‑1)的水苏糖、 低聚甘露糖和 低聚木糖。 2.根据权利要求1所述促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养基， 其特征在于， 所述益 生元组合物中还 包括阿拉伯树胶和/或燕麦 β‑葡聚糖； 其中， 所述阿拉伯树胶的添加量占所述益生元组合物总质量的1 ‑5%， 燕麦β‑葡聚糖的 添加量占所述 益生元组合物总质量的0.5 ‑2%。 3.根据权利要求1所述促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养基， 其特征在于， 所述培 养基中还 包括0.1‑1%的氨基酸复合物； 其中， 所述氨基酸 复合物包括质量比为(5 ‑6):(2‑3):(1‑2):(0.5‑1)的L‑缬氨酸、L‑蛋 氨酸、γ‑氨基丁酸和γ‑聚谷氨酸。 4.一种如权利要求1 ‑3中任一项所述促进乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养基在促进 乳杆菌和双歧杆菌协同增殖中的应用。 5.根据权利 要求4所述的应用， 其特征在于， 所述乳杆菌选自鼠李糖乳杆菌LRa05、 干酪 乳杆菌LC89、 嗜酸乳杆菌LA85或植物乳杆菌Lp90中的任意 一种或至少两种的组合。 6.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述双歧杆菌选自动物双歧杆菌乳亚种 BLa80、 长双歧杆菌BL21、 两歧双歧杆菌BBi32或短双歧杆菌BBr60中的任意一种或至少两种 的组合。 7.一种乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养方法， 其特征在于， 所述培养方法包括以下 步骤： （1） 将乳杆菌和双歧杆菌混合后， 接种于活化培 养基中， 进行活化， 得到活化复合菌； （2） 将步骤 （1） 得到的活化复合菌接种于权利要求1 ‑3中任一项所述促进乳杆菌和双歧 杆菌协同增殖的培 养基中， 进行培 养， 得到发酵 液。 8.根据权利要求7所述的乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养方法， 其特征在于， 步骤 （1） 中， 所述活化培养基为改良MRS液体培养基， 所述改良MRS液体培养基按质量百分含量计 由如下组分组成： 蛋白胨0.5 ‑5%、 牛肉膏0.5 ‑2%、 葡萄糖1 ‑3%、 酵母浸膏0.1 ‑2%、 柠檬酸氢二 铵0.05‑0.5%、 K2HPO4 0.05‑1%、 MgSO4 0.01‑1%、 MnSO4 0.01‑0.03%、 吐温 ‑80 0.05‑0.5%， 余 量为水。 9.根据权利要求7所述的乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养方法， 其特征在于， 步骤 （1） 中， 所述活化的具体步骤为： 将质量比为(0.5 ‑2):1的乳杆菌和双歧杆菌混合得到混合菌种， 以1 ‑5 vol%的接种量 接种于活化培养基中， 在35 ‑40℃下培养12 ‑24 h后， 以7000 ‑9000 g的离心力离心5 ‑15  min， 分离得到混合菌泥； 再将混合菌泥重悬于生理盐水中， 所述混合菌泥和生理盐水的质 量比为1:(9 ‑15)， 得到活化复合菌 。 10.根据权利要求7所述的乳杆菌和双歧杆菌协同增殖的培养方法， 其特征在于， 步骤 （2） 中， 所述培 养的具体步骤为：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114854643 A 2将步骤 （1） 得到的活化复合菌以1 ‑5 vol%的接种量接种于所述促进乳杆菌和双歧杆菌 协同增殖的培 养基中， 于厌氧 条件35‑40℃下培 养15‑25 h后， 得到发酵 液。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114854643 A 3