(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210637554.7 (22)申请日 2022.06.08 (71)申请人 源民生物科技 （山 东） 有限公司 地址 261000 山东省潍坊市高新区健康东 街以南高新二路以东研发中心 （生物 医药科技产业园G座3 06-10室） (72)发明人 李华文　张雪松　范雅彬　付鹏飞　 梁立贺　关艳平　 (74)专利代理 机构 山东华君知识产权代理有限 公司 373 00 专利代理师 李欣 (51)Int.Cl. A61K 36/8945(2006.01) A61K 9/14(2006.01) A61K 35/744(2015.01)A61K 35/747(2015.01) C12N 1/20(2006.01) C12N 1/04(2006.01) A61P 25/20(2006.01) C12R 1/25(2006.01) C12R 1/225(2006.01) C12R 1/46(2006.01) (54)发明名称 一种具有安神助眠功能的益 生菌群组合物 (57)摘要 本发明公开了一种具有安神助眠功能的益 生菌群组合物， 属于益生菌群组合物技术领域， 所述益生菌群组合物， 按重量份计， 由以下成分 组成： 80‑85份一次混合物， 105 ‑110份二次混合 物， 4‑6份麦芽糊精； 所述益生菌群组合物的制备 方法， 具体为： 将一次混合物、 二次混合物、 麦芽 糊精混合后加入粉碎机中进行常温粉碎， 粉碎至 400‑600目， 得到具有安神助眠功能的益生菌群 组合物； 本发 明的益生菌群组合物能够缓解预防 焦虑、 失眠人群的睡眠障碍、 焦躁情绪， 避免副作 用和耐药性。 权利要求书2页 说明书16页 CN 114699477 A 2022.07.05 CN 114699477 A 1.一种具有安神助眠功能的益生菌群组合物， 其特征在于， 按重量份计， 由以下成分组 成： 80‑85份一次混合物， 15 ‑20份二次混合物， 4 ‑6份麦芽糊精； 所述一次混合物的制备方法为： 将改性发酵菌粉、 冻干保护剂、 稳定剂混合后置于搅拌 器中进行搅拌， 控制搅拌器内的温度为30 ‑35℃， 搅拌速度为180 ‑200rpm， 搅拌时间为30 ‑ 35min， 搅拌结束后得到初 级一次混合物， 将初 级一次混合物置于 ‑35℃至‑30℃的冰箱中预 冻处理25 ‑30min后， 转移至真空冷冻干燥机中进行真空冷冻干燥处理， 控制真空冷冻干燥 处理的温度为 ‑45℃至‑40℃， 真空度为300 ‑400Pa， 处理时间为55 ‑60min， 真空冷冻干燥处 理结束得到一次混合物； 所述一次混合物的制备中， 改性发酵菌粉、 冻干保护剂、 稳定剂的重量比为70 ‑75:6‑8: 0.2‑0.5； 所述冻干保护剂的制备方法为： 将预糊化淀粉、 葡萄糖、 麦芽糊精、 蔗糖、 乳糖、 脱脂奶 粉混合后加入去离子水中， 在35 ‑40℃下以280 ‑300rpm的转速搅拌40 ‑45min， 然后 在117.5‑ 118.5℃下灭菌25 ‑30min， 得到冻干保护剂； 所述冻干保护剂的制备中， 预糊化淀粉、 葡萄糖、 麦芽糊精、 蔗糖、 乳糖、 脱脂奶粉、 去离 子水的重量比为10 0‑110:10‑15:60‑65:20‑25:10‑15:30‑40:650‑700； 所述改性发酵菌粉的制备方法， 由以下步骤组成： 制备种子液、 制备发酵液、 发酵液干 燥； 所述制备种子液的方法为， 分别将冻存的植物乳杆菌、 鼠李糖乳杆菌、 副干酪乳杆菌、 瑞士乳杆菌、 嗜热链球菌在固体LB平板上划线进行活化， 然后 分别从LB平板中挑选单菌落 接种于250mL锥形瓶中， 瓶内装有100mL液体培养基， 分别将250mL锥形瓶放入摇床进行摇床 培养， 控制摇床培养的温度为36 ‑38℃， 转速为200 ‑220rpm， 时间为14 ‑15h， 摇床培养结束后 分别得到植物乳杆菌种子液、 鼠李糖乳杆菌种子液、 副干酪乳杆菌种子液、 瑞士乳杆菌种子 液、 嗜热链球菌种子液； 所述制备发酵液的方法为， 分别将植物乳杆菌种子液、 鼠李糖乳杆菌种子液、 副干酪乳 杆菌种子液、 瑞士乳杆菌种子液、 嗜热链球菌种子液依次接种于同一改良MRS液体培养基， 控制植物乳杆菌的接种 量为1‑2%， 鼠李糖乳杆菌的接种 量为2‑3%， 副干酪乳杆菌的接种 量 为2‑3%， 瑞士乳杆菌的接种量为 1‑3%， 嗜热链球菌的接种量为 1‑2%， 接种完成后进行搅拌发 酵培养， 控制搅拌发酵培养的温度为36 ‑38℃， 转速为300 ‑320rpm， 通气量为1.2 ‑1.5vvm， 时 间为20‑22h， 搅拌发酵培 养结束得到发酵 液； 所述发酵液干燥的方法为， 将发酵液、 鼠李糖脂、 普鲁兰多糖、 大豆多糖、 酪朊酸钠混合 均匀后得到混合发酵液， 将混合发酵液的温度控制到30 ‑35℃， 然后向混合 发酵液中通入混 合气体进行改性， 控制改性过程中混合气体的流量为4 ‑5L/min， 改性时间为10 ‑12min， 改性 结束得到改性发酵液， 对改性发酵液进行离心分离， 控制离心分离过程中的转速为1600 ‑ 1800rpm， 离心分离的时间为8 ‑10min， 离心分离结束得到菌泥， 将 菌泥进行真空冷冻干燥处 理， 控制真空冷冻干燥处理的温度为 ‑35℃至‑30℃， 真空度为600 ‑700Pa， 处理时间为50 ‑ 60min， 真空冷冻干燥结束得到改性发酵菌粉； 所述发酵液干燥中， 发酵液、 鼠李糖脂、 普鲁兰多糖、 大豆多糖、 酪朊酸钠的重量比为 40‑45:5‑7:2‑4:3‑4:1‑2； 所述混合气体为氧气和二氧化碳的混合气体， 其中， 氧气与二氧化碳的体积比为3:6 ‑权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114699477 A 28； 所述稳定剂的制备方法为： 将黄原胶、 微晶纤维素、 麦芽糊精混合均匀后 置于‑25℃至‑ 20℃下冷冻处 理40‑45min， 得到稳定剂； 所述稳定剂的制备中， 黄原胶、 微晶纤维素、 麦 芽糊精的重量比为6 ‑9:1‑1.5:3‑4； 所述二次混合物的制备方法为： 将中药纳米粉、 表面活性剂混合后进行超声震荡， 控制 超声震荡的频率为30 ‑45kHz， 功率为100 ‑150W， 时间为25 ‑30min， 超声震荡结束得到初 级二 次混合物， 将初级二次混合物置于电晕放电仪内进行电晕处理， 控制电晕处理的电压为8 ‑ 10kV， 时间为20 ‑25s， 电晕处 理结束得到二次混合物； 所述二次混合物的制备中， 中药纳米粉与表面活性剂的重量比为17 ‑20:5‑7； 所述中药纳米粉的制备方法为： 分别将人参、 山药、 茯苓、 白术清洗干净后 置于40‑45℃ 下烘干， 然后分别使用粉碎机粉碎至400 ‑500 μm， 得到人参粉、 山药粉、 茯苓粉、 白术粉， 将人 参粉、 山药粉、 茯苓粉、 白术粉按照重量比为3 ‑5:16‑18:7‑9:4‑7混合均匀后得到混合粉， 将 混合粉与去离子水按照重量比为1:3 ‑3.5混合后加热至80 ‑85℃， 在80 ‑85℃下煎煮1.5 ‑2h， 过滤后取滤液作为提取液， 向提取液中加入海藻酸钠、 明胶， 加热至70 ‑75℃， 在70 ‑75℃下 煎煮1‑1.5h， 然后进行喷雾干燥， 控制喷雾干燥中的进风温度为150 ‑160℃， 出风温度为70 ‑ 75℃， 喷雾干燥结束得到中药粉， 将中药粉、 大豆卵磷脂、 壳聚糖置于球磨 机中进行球磨， 控 制球磨中的球料比为15 ‑18:1， 转速为400 ‑450rpm， 球磨时间为50 ‑55min， 球磨结束得到中 药纳米粉； 所述中药纳米粉的制备中， 提取 液、 海藻酸钠、 明胶的重量比为10 0‑105:5‑8:6‑9； 所述中药纳米粉的制备中， 中药粉、 大豆卵磷脂、 壳聚糖的重量比为5 5‑60:5‑8:2‑4； 所述表面活性剂的制备方法为： 将柠檬酸、 脂肪酸蔗糖聚酯、 山梨糖醇混合均匀后置 于‑20℃至‑15℃下冷冻处理30 ‑35min， 然后置于球磨机中进行球磨， 控制球磨中的球料比 为10‑12:1， 转速为3 00‑350rpm， 球磨时间为 40‑45min， 球磨结束得到表面活性剂； 所述表面活性剂的制备中， 柠檬酸、 脂肪酸蔗糖聚酯、 山梨糖醇的重量比为10 ‑13:7‑ 10:5‑8。 2.根据权利要求1所述的具有安神助眠功能的益生菌群组合物， 其特征在于， 所述液体 培养基的组成， 按重量份计， 由以下成分组成： 1 ‑2份大豆蛋白胨， 2 ‑3份葡萄糖， 0.2 ‑0.5份 氯化钠， 94.5 ‑96.8份去离 子水。 3.根据权利要求1所述的具有安神助眠功能的益生菌群组合物， 其特征在于， 所述改良 MRS液体培养基的制备方法为： 将葡萄糖、 大豆蛋白胨、 酵母浸粉、 柠檬酸氢二胺、 无水乙酸 钠、 磷酸氢二钾、 低聚异麦芽糖、 预糊化淀粉混合均匀后加入去离子水中， 在35 ‑40℃下以 300‑350rpm的搅拌速度搅拌35 ‑40min， 然后在117.5 ‑118.5℃下灭菌20 ‑22min， 得到改良 MRS液体培 养基； 所述改良MRS液体培养基的制备中， 葡萄糖、 大豆蛋白胨、 酵母浸粉、 柠檬酸氢二胺、 无 水乙酸钠、 磷酸氢二钾、 低聚异麦芽糖、 预糊化淀粉、 去离子水的重量比为