(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210894299.4 (22)申请日 2022.07.27 (83)生物保 藏信息 CGMCC No. 19503 2020.0 3.24 (71)申请人 国家林业和草原局林草调查 规划院 地址 100714 北京市东城区和平里东 街18 号4号楼 (72)发明人 蒋丽伟　郑冬梅　宫殷婷　方健梅　 郑桂莲　张月莹　赵一臣　李宗伦　 周金星　彭霞薇　 (74)专利代理 机构 北京知文通达知识产权代理 事务所(普通 合伙) 16051 专利代理师 欧阳石文 (51)Int.Cl. C05G 3/00(2020.01)C05G 3/60(2020.01) C05G 3/80(2020.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/07(2006.01) C12R 1/465(2006.01) (54)发明名称 一种具有生防功能的微生物有机调理剂及 应用 (57)摘要 本发明涉及肥料技术领域， 具体涉及具有生 防功能的微生物有机调理剂的制备方法及应用。 其是将拮抗细菌、 拮抗放线菌分别发酵后， 进行 混合得到混合菌体， 再与有机调理剂混合得到。 本发明以园林绿化废弃物为主要基质来源的有 机调理剂与具有拮抗病原菌功能的微生物配合 制备成生防微生物调理剂， 解决园林绿化废弃物 合理的资源化利用， 稳定微生物菌种活性和功 能， 并实现土传病害的预防效果。 权利要求书1页 说明书7页 附图1页 CN 115504827 A 2022.12.23 CN 115504827 A 1.一种具有生防功能的微 生物有机调理剂的制备 方法， 其包括如下步聚： 将拮抗细菌、 拮抗放线菌分别发酵后， 进行混合得到混合菌体， 再与有机调理剂混合， 其中所述拮抗细菌是暹罗芽孢杆菌 （ Bacillus  siamensis ） LS275， 其保藏号为CGMCC  No.  19505； 所述拮抗放线菌是纺锤链霉菌 （ Streptomyces  netropsis ） LS159， 其保藏编号为 CGMCC No. 19505； 所述有机调理剂是园林绿化废弃物粉碎物添加新鲜鸡粪和蘑菇渣后经 高温好氧堆肥后烘干、 粉碎的有机肥， 或者是高温碳化后的生物炭， 或者是直接将园林绿化 废弃物粉碎后的粉碎 物。 2.如权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述混合菌体是将 发酵好的两种菌液按体积 比1:0.5‑1.5混合， 离心收集得到混合菌体。 3.如权利要求2所述的方法， 其特征在于， 所述混合菌体是将 发酵好的暹罗芽孢杆菌菌 液和纺锤链霉菌菌液等体积混合， 室温条件下4000  rpm离心收集菌体， 将菌体放置于搅拌 机中搅拌打断链霉菌 菌丝成小片段即得。 4.如权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述混合菌体与有机调理剂的比例按重量比 0.5‑1.5:5混合， 黑暗静置放置5 ‑10天时间， 然后再按重量比0.25 ‑0.75:100的比例分别添 加到有机调理剂中。 5.如权利要求3所述的方法， 其特征在于， 所述暹罗芽孢杆菌LS275的发酵液获得方法 是： 在LB液体培养基中， 30℃， 180rpm摇床条件下培养暹罗芽孢杆菌LS275， 20 ‑28h 后得种 子液； 将上述种子液按种子液与LB培养基体积比5 ‑10%的接种量接种至已灭菌的发酵罐中， 进行扩大发酵培 养， 在温度  30℃的条件下， 培 养 42‑56h 后得暹罗芽孢杆菌 菌液； 所述纺锤链霉菌LS159发酵液获得方法为： 在ISP2液体培养基中， 30℃、 150rpm  摇床条 件下培养42 ‑54h后获得种子液； 将上述种子液按种子液与ISP2培养基体积比5 ‑10%的接种 量接种至已灭菌的发酵罐中， 进 行扩大发酵培养， 在温度  30℃的条件 下， 培养64 ‑80h 后得 纺锤链霉菌 菌液。 6.如权利要求1所述的方法， 其特征在于， 所述有机肥中含园林绿化废弃物粉碎物80%， 新鲜鸡粪10%、 蘑菇渣10%， 经高温好氧堆肥后烘干、 粉碎， 过4目筛， 筛下物即得； 所述生物炭的原料为园林绿化废弃物粉碎物在500 ‑600℃、 缺氧条件下处理3 ‑5h， 粉碎 后过4目筛， 筛下物即得； 所述直接粉碎 物为园林绿化废弃物直接粉碎， 过4目筛， 筛下物即得。 7.如权利要求1至 6任一项所述的方法获得的微 生物有机调理剂。 8.如权利要求7 所述的微 生物有机调理剂在植物栽培中的应用。 9.如权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述应用是促进植物生长和/或改良土壤和/ 或增强植物抗病能力。 10.如权利要求9所述的应用， 其特征在于所述增强植物抗病能力是指增强抗根部病 害 的能力； 优选地， 所述植物是农作物、 花卉、 树木； 更进一步的， 所述植物蔬菜， 具体的是白 菜， 优选地用于防治白菜根腐病。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115504827 A 2一种具有生防功能的微生物有机调理剂及应用 技术领域 [0001]本发明涉及肥 料技术领域， 具体涉及具有生防功能的微 生物有机调理剂及应用。 背景技术 [0002]植物在生长过程中受到多种病害威胁， 其中土传病害是发生在植株根部或茎基 部， 主要以土壤为媒介进 行传播的一类病害统称， 如根腐病、 枯萎病、 立枯病、 猝倒病等病害 种类。 植物土传病害的病原微生物生活史一部分或大部分存在于土壤中， 在条件适宜时病 原菌萌发并侵染植物根部或茎部导致植物发生病害。 其中， 土壤的健康状况直接影响植物 土传病害发生频率和严重程度。 近年来由于大量施用化肥， 造成土壤肥力失衡、 下降， 土壤 酸化、 板结等问题， 土壤微生物区系紊乱， 土传病害有 逐年加重的趋势。 因此， 在田间肥料施 用时增施有机肥或化肥结合有机调理剂的使用， 可以改善土壤理化性质， 从而可能起到减 轻土传病害发生的效果。 [0003]当土传病害发生时， 化学农药的使用能够起到较好的防病作用， 然而化学农药的 大量使用， 造成环境污染、 抗性基因积累， 以及 食品安全等问题。 生物防治因其低成本、 环 境 友好和无药物残留等特点已成为国内外防治植物土传病害的研究热点， 随着人们生活水平 的提高， 对生态安全及绿色食品需求的意识增强， 未来生物防治将有望取代传统的化学防 治手段， 显示出较为广阔的应用前景。 然而， 目前生防菌剂在实际生产应用时往往存在效果 不稳定或不理想等问题， 其中一个重要原因是土壤条件的 限制。 研究表明， 微生物的成功定 殖及功能发挥需要良好的土壤环境， 包括适宜的土壤酸碱度、 通透性、 养分和有机质等， 有 机物料的土壤施用能够有效 改良土壤理化性质， 为微生物的生长、 繁殖提供适宜的环境， 进 而有利于功能微 生物的效果发挥。 [0004]随着城市生态文明建设的发展， 以及人们对森林多重效益与价值的认识， 城市绿 化造林面积持续增加， 随之而来的是绿化废弃物的逐年激增。 以北京市为例， 从2012年开 始， 北京市大力实施百万亩平原造林工程， 显著增加了北京市森林覆盖率， 2018年， 北京市 新一轮百万亩造林绿化行动开始实施， 每年绿化废弃物总量超过500  万吨， 而销纳 处置能 力不足10%， 产生严重的城市环境问题。 园林绿化废弃如何科学、 合理处置这些废弃物， 在不 污染环境的前提下， 使其变废弃为宝对于科研工作者来说是亟待解决的问题。 绿化废弃物 中因有机质含量丰富， 适当处理后可以作为土壤改良剂及有机肥生产原料进行综合利用， 对于绿化废弃物的资源化利用， 目前主要采用堆肥腐熟技术制备成有机肥、 高温碳化制备 为生物炭， 以及直接粉碎利用等方式。 园林绿化废弃物通过上述方式的处理应用， 能够起到 低土壤密度、 提高土壤保水能力、 增加土壤孔隙度的土壤改良作用； 并且能显著增加土壤有 机质和土壤有效养分含量的效果。 然而， 它们对保护微生物细胞 活性， 以及联合生防微生物 预防土传病害方面的作用如何， 还 鲜见有相关实验研究。 发明内容 [0005]本发明对比了绿化废弃物不同资源化处理方式后产品， 包括堆肥腐熟技术制备成说　明　书 1/7 页 3 CN 115504827 A 3