(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210746990.8 (22)申请日 2022.06.29 (71)申请人 山西农业大 学 地址 030800 山西省晋中市太 谷县铭贤南 路兴农街1号 (72)发明人 霍乃蕊　杨茹洁　陈丽琴　张鑫鑫　 裴雯悦　李宏全　张婷　李涌　 刘永强　 (74)专利代理 机构 太原晋科知识产权代理事务 所(特殊普通 合伙) 14110 专利代理师 翟冲燕 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/38(2006.01) C12N 1/02(2006.01)C12R 1/225(2006.01) C12R 1/01(2006.01) (54)发明名称 一种分离乳酸菌的选择培养基及其在肠道 乳酸菌分离中的应用 (57)摘要 本发明属微生物 技术领域， 为解决乳酸菌选 择性培养基研究少， 缺乏针对分离基质中的微生 物多样性不复杂等问题， 提供一种分离乳酸菌的 选择培养基及其在肠道乳酸菌分离中的应用。 由 基础MRS培养基中加入羊骨胶原短肽、 抗生素与 食品防腐剂； 其中： 羊骨胶原短肽的添加量为20   mg/L， 所述抗生素为多粘菌 素E硫酸盐， 添加量为 47 mg/L； 所述食品防腐剂为山梨酸， 添加量为 1000 mg/L。 菌落计数和鉴定结果与粪便微生物 高通量测序结果一致。 高通量测序结果中优势乳 酸菌罗伊氏乳杆菌和格氏乳杆菌的相对丰度分 别为0.22 6833%和0.0538%， 二者之比为4.6， 可从 微生态区系复杂的基质中准确 高效地分离乳酸 菌。 权利要求书1页 说明书7页 附图7页 CN 115369056 A 2022.11.22 CN 115369056 A 1.一种分离乳酸菌的选择培养基， 其特征在于： 由基础MRS培养基中加入羊骨胶原短 肽、 抗生素与食品防腐 剂； 其中： 羊骨胶原短肽的添加量为20  mg/L， 所述抗生素为多粘菌素 E硫酸盐， 添加量 为47 mg/L； 所述食品防腐剂为 山梨酸， 添加量 为1000 mg/L。 2.权利要求1所述的分离 乳酸菌的选择培 养基在肠道乳酸菌分离中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115369056 A 2一种分离 乳酸菌的选择培养基 及其在肠道乳酸菌分离中的 应用 技术领域 [0001]本发明属于微生物技术领域， 具体涉及一种分离乳酸菌的选择培养基及其在肠道 乳酸菌分离中的应用。 背景技术 [0002]抗生素滥用会引发二重感染、 耐药菌株及药物残留等一系列问题， 给动物和人类 健康以及环境造成严重威胁。 我国已经禁止在饲料中添加 抗生素， 对养殖业提出了新的挑 战， 因而安全、 有效、 无副作用的抗 生素替代品成为必然选择。 [0003]乳酸菌是可用于饲料添加的微生物， 可抑制肠道病原菌 的生长， 维持肠道微生态 平衡， 增强动物的免疫力， 提高生产性能， 提高饲料转化率等， 并且安全 无污染、 对动物和人 体无毒副作用， 因而成为 抗生素替代的首要选择。 [0004]乳酸菌广泛存在 于人和动 物肠道、 植物和果 蔬表面、 发酵食品 （泡菜、 酸菜） 、 大曲、 酒醅和醋醅等发酵基质中。 [0005]肠道内乳酸菌可维持肠道微生态平衡， 抑制病原菌定植， 合成和分泌维生素B12， 增强机体免疫功能。 肠道定植是乳酸菌发挥益生作用的前提。 在生产实践中， 乳酸菌的益生 效果差异很大， 菌株定植的宿主特异性被认为是主要原因之一。 由于寄主和肠道菌之间存 在着特异性相互选择关系， 理想的益生菌最好来自同源动物的肠道， 所以不同养殖动物肠 道乳酸菌的分离和改良育种显得非常重要。 同样， 在发酵工业中， 外源乳酸菌尽管性能优 良， 但难以适应新的发酵基质和发酵环境， 所以发酵环境中土著乳酸菌的分离和育种也十 分必要。 [0006]然而， 乳酸菌所处的肠道、 自然发酵食品、 大曲、 酒醅、 醋醅等发酵菌剂和发酵基质 中的微生物类型很多， 数量庞大， 给乳酸菌 分离工作带来严重挑战， 因此需要设计一种乳酸 菌专用选择培养基， 在这种培养基上， 酵母菌、 霉菌等真菌不生长， 革兰氏阴性菌不生长、 非 目标菌之外的革兰氏阳性菌也 不生长， 只有目标菌 乳酸菌可以生长 繁殖， 形成菌落。 [0007]目前关于乳酸菌培养基的研究多集中于富集培养基和计数培养基， 前者主要用于 某一特定纯种乳酸菌的扩大培养， 如保加利亚乳杆菌； 嗜热链球菌； 后者主要用于活性乳酸 菌制品中的乳酸菌数量的真实计数。 [0008]选择性培养基主要是通过抑制或杀灭杂菌来分离目标菌， 有关乳酸菌选择性培养 基设计研究较少 。 现有研究针对的非目标微生物比较单一或者十分明确， 分离基质中的微 生物多样性 不是很复杂； 常用的抑制剂为 抗生素， 通过 单用或复配来实现。 发明内容 [0009]本发明为了解决目前乳酸菌选择性培养基研究少， 缺乏针对分离基质中的微生物 多样性不复杂等问题， 提供了一种分离乳酸菌的选择培养基及其在肠道乳酸菌 分离中的应 用。说　明　书 1/7 页 3 CN 115369056 A 3