(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210788476.0 (22)申请日 2022.07.06 (71)申请人 樊瑞冬 地址 157000 黑龙江省牡 丹江市东 安区卧 龙街领秀城 小区3栋3单元601室 (72)发明人 陈孝玉龙　樊瑞冬　邹华艳　 杨世超　冯泽锐　秦顺　唐小力　 杨洪　桑维钧　刘丽　 (74)专利代理 机构 北京国坤专利代理事务所 (普通合伙) 11491 专利代理师 张国栋 (51)Int.Cl. C12N 1/20(2006.01) C12N 1/38(2006.01) C12N 3/00(2006.01)C12R 1/465(2006.01) (54)发明名称 一种利于产孢与次生代谢物产生的新型放 线菌培养基 (57)摘要 本发明公开了一种利于产孢与次生代谢物 产生的新型放线菌培养基， 包括以下原料： 蔗糖、 硝酸钠、 磷酸氢二钾、 硫酸镁、 氯化钾、 硫酸亚铁、 酵母浸粉和琼脂。 本发明提供的培养基培养的 FT05W和ZEA17I的产孢量相比G1和ISP2培养基 更 高， 产孢量的增加更为未来开发链霉菌类生物制 剂的生产及应用奠定重要基础； 链霉菌株FT05W 和ZEA17I经CY、 G1、 ISP2 培养基培养后IAA的含 量 依次降低； FT05W和ZEA17I经CY培养基培养后的 溶磷能力显著高于ISP2培养基； 固氮能力显著高 于G1培养基； ZEA17I于CY培养基培养后的纤维素 酶产量显著高于G1和ISP2培养基。 除此之外， FT05W和ZEA17I两株链 霉菌经CY培养基培养后多 种水解酶的产量均高于G1和IS P2培养基。 权利要求书1页 说明书6页 附图4页 CN 115353991 A 2022.11.18 CN 115353991 A 1.一种利 于产孢与次生代谢物产生的新型放线菌培养基， 其特征在于： 包括以下原料： 蔗糖、 硝酸钠、 磷酸氢二钾、 硫酸镁、 氯化钾、 硫酸 亚铁、 酵母 浸粉和琼脂 。 2.根据权利要求1所述的一种利于产孢与次生代谢物产生的新型放线菌培养基， 其特 征在于： 所述培养基中各原料的浓度为： 蔗糖28 ‑32g/L、 硝酸钠2 ‑4g/L， 磷酸氢二钾0.8 ‑ 1.2g/L， 硫 酸镁0.4‑0.6g/L， 氯化钾0.4 ‑0.6g/L， 硫酸亚铁0.008 ‑0.012g/L， 酵母浸粉2 ‑4g/ L， 琼脂14 ‑16g/L。 3.根据权利要求1所述的一种利于产孢与次生代谢物产生的新型放线菌培养基， 其特 征在于： 所述培养基中各原料的浓度为： 蔗 糖30g/L， 硝酸钠3g/L， 磷酸氢二钾1g/L， 硫酸镁 0.5g/L， 氯化钾0.5g/L， 硫酸 亚铁0.01g/L， 酵母 浸粉3g/L， 琼脂15g/L。 4.根据权利要求2所述的一种利于产孢与次生代谢物产生的新型放线菌培养基， 其特 征在于： 按照上述浓度称 取培养基中各原料， 于1 ×105Pa条件下灭菌处理30min， 冷却至50 ‑ 60℃倒平板备用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115353991 A 2一种利于产孢与次生代谢物产生的新型放线菌培养基 技术领域 [0001]本发明涉及 放线菌培养技术领域， 具体为一种利于产孢与次生代谢物产生的新型 放线菌培养基。 背景技术 [0002]链霉菌(Streptomycesspp.)是普遍存在于土壤中的革兰氏阳性细菌， 能够 显著促 进有机物的周转。 它们是Actinomycetales， Streptomycetaceae中最大的属。 链 霉菌株脱叶 链霉菌(Streptomycesexfoliatus)FT05W和 深蓝链霉菌(S.cyaneus)ZEA17I分离自植物根 部， 已被报道在体外实验中表现出对核盘菌(Scleroti niascleroti orum)有高度 抑制作用。 [0003]链霉菌FT05W和ZEA17I具有从生菜(Lactucasativa)种子萌发和根系发育的早期 阶段就与宿主相互作用的能力， 及与生菜长期相互作用的潜力。 对促进烟草 (Nicotianatabacum)、 蔬菜等种子的萌发， 提高番茄(Lycopersiconesculentum)、 非洲菊 (Gerberajamesonii)等 园艺植物的抗逆性， 促进植株生长有一定的作用。 两株链霉菌 能够 溶解磷酸盐、 产生几丁质酶等多种次生代谢产物， 是优良的真菌病害生防菌株和植物促生 菌株。 特别是FT05W在农业中具有很高的潜力， 可用于管 理现有植保产品难以控制的土传病 害。 [0004]磷、 氮是植物的必需营养元素， 在植物生长发育过程中发挥重要的作用。 土壤中含 有丰富的磷元素， 但绝大多数以难溶性盐的形式存在， 无法被植物直接吸收利用。 植物根际 中存在着大量的能将土壤中难溶性磷转化成植物可以直接吸收的可溶性磷的微生物。 氮肥 对提高土壤肥力和农业增产增收都发挥了重要作用。 但过量、 不合理的施氮方式导致氮肥 利用率低， 能源浪费严重， 产生环境问题等。 利用能够固定大气中氮气的微生物， 为植物提 供氮素营养。 Benson和Silvester 提出植物 根际的链霉菌具有固氮作用， 能与植物形成共生 关系， 进而促进植物的生长。 微生物对不同的营养物质包括碳源、 氮源、 维生素、 无机盐和微 量元素等利用能力不同。 碳源能为生物合成提供碳骨架和碳水化合物， 包括蔗糖、 葡萄糖、 果糖、 麦芽糖、 可溶性淀粉等； 氮源能够为合成氨基酸、 蛋白质等提供原料， 包括酵母浸粉和 蛋白胨等有机氮， 以及无机氮如 硫酸铵和 硝酸盐等。 推测新型培养基中存在蔗糖、 磷酸氢二 钾、 酵母浸粉等碳氮源， 进而有利于两株链霉菌的产孢和IAA、 水解酶等次生代谢产物的产 生。 [0005]研究表明， 培养基种类对同种菌株孢子的数量及次级代谢产物的产生等指标存在 影响， 目前链霉菌常用培养基为高氏一号琼脂培养基(G1)和ISP2培养基(ISP2)， 而经高氏 一号琼脂培养基(G1)和ISP2培养基(ISP2)对链霉菌培养时的产孢量与次生代谢物产量较 低， 所以如何优化FT0 5W和ZEA17I的产孢量和次级代谢产物的量是急需解决的问题。 发明内容 [0006]本发明的目的在于提供一种利于产孢与次生代谢物产生的新型放线菌培养基， 以 解决上述背景技 术中提出的问题。说　明　书 1/6 页 3 CN 115353991 A 3