(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210856760.7 (22)申请日 2022.07.20 (71)申请人 赵卫华 地址 213022 江苏省常州市新北区怀德名 园5-甲-1001室 (72)发明人 赵卫华　 (74)专利代理 机构 常州市英 诺创信专利代理事 务所(普通 合伙) 32258 专利代理师 王志慧 (51)Int.Cl. A01G 31/00(2018.01) A01G 24/28(2018.01) A01G 24/12(2018.01) A01G 24/15(2018.01) A01G 24/25(2018.01)A01G 24/20(2018.01) A01H 4/00(2006.01) A01G 7/06(2006.01) C12N 1/14(2006.01) C12N 1/20(2006.01) C12R 1/465(2006.01) C12R 1/645(2006.01) C12R 1/885(2006.01) (54)发明名称 一种利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活 率的方法 (57)摘要 本发明公开一种利用AM真菌提高月季组培 苗炼苗成活率的方法。 通过采集自然状态下生长 健壮的月季根际土壤—分离AM菌根真菌—筛选 出促植物根须生长较为显著的菌种—分离纯化 后稀释接种到组培月季无菌基质上， 得到月季丛 枝菌根真菌菌剂基质介质， 然后将其和长枝木霉 菌、 细黄链霉菌的微生物菌剂混合， 并加入营养 成分， 搅拌混合后得栽培基质， 将组培小苗移植 到栽培基质中， 提高了组培月季小苗炼苗的成活 率， 并且使得小苗对环境的抗逆性(耐旱性)、 抗 病性得到了显著的提升， 对月季组培苗炼苗研究 起到积极的意 义。 权利要求书1页 说明书9页 附图1页 CN 115005076 A 2022.09.06 CN 115005076 A 1.一种利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法， 其特 征在于： (1)采集长势良好月季的根部土壤， 从土壤 中对AM真菌菌种的分离与纯化， 得到AM真菌 孢子接种到植物幼 苗的根系上扩繁培养， 培养后连根拔起， 去掉植物地上部 分， 将植物根切 碎成小段与根际培 养基质混匀， 得到月季丛枝菌根真菌 菌剂基质介质； (2)由长枝木霉菌、 细黄链霉菌按质量比8～10:1混合得到微生物菌剂， 将月季丛枝菌 根真菌菌剂基质介质和微生物菌剂按质量比100～120:0.5～1混合， 加入 营养物质， 混合均 匀后得到栽培基质； (3)月季组培： 将剪取月季茎尖作为芽苗， 先进行预处理， 处理进行初代培养、 继代培 养、 生根培养， 将生根后的月季小苗移栽到步骤(2)的栽培基质进行炼苗。 2.根据权利要求1所述利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法， 其特征在于： 所 述根际培养基质是由河 沙： 草炭： 珍珠岩： 蛭石： 稻壳质量比＝10～15： 10～15： 1～3： 1～3： 1 ～2混合得到， 并加入根际培养基质质量分数1 ‑2％的保水剂， 将吸水后呈凝胶状保水剂混 合在基质中。 3.根据权利要求1所述利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法， 其特征在于： 所 述AM真菌为透光球囊霉、 幼套球囊霉、 摩西球囊霉中的一种或几种混合； 每10g月季丛枝菌 根真菌菌剂基质介质中的AM真菌孢子数 大于300粒。 4.根据权利要求3所述利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法， 其特征在于： 所 述AM真菌为透光球囊霉和幼套球囊霉混合使用。 5.根据权利要求1所述利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法， 其特征在于： 营 养物质为： 硫酸镁、 磷酸二氢钾、 硫酸铵、 硝酸钙、 硝酸钾、 硼砂、 硫酸锰、 硫酸锌、 硫酸铜和钼 酸钠、 碳酸钾、 柠檬酸中两种以上物质混合得到， 营养物质加入量为月季丛枝菌根真菌菌剂 基质介质 质量的0.1～3％。 6.根据权利要求1所述利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法， 其特 征在于： 月季组培： 剪取月季茎尖用自来水冲洗， 用质量浓度70 ％酒精消毒， 用0.1wt.％生汞消 毒5min， 无菌水冲洗3 ‑4次， 将处理后的幼芽至芽分化培养基， 培养6～8天， 基部产生愈伤组 织， 顶芽开始生长； 待芽苗长出5 ‑7片叶， 将其切成带1 ‑2个叶片的茎段， 转入继代培养基进 行继代培养， 四周继代培养一次； 将继代增殖无根苗切成1.5cm茎段移植生根培养基中， 待 根长1cm时， 进行移栽炼苗。 7.根据权利要求6所述利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法， 其特征在于： 芽 分化培养基各成分为： MS培养基、 0.75mg/L  BA、 0.25mg/L  IAA、 0.2mg/L  NAA、 0.1mg/L  ZT、 蔗糖5wt.％； 继代培养基各成分为： MS培养基、 0.75mg/L  BA、 0.75mg/L  IAA、 0.2mg/L  NAA、 0.1mg/L   ZT、 蔗糖3wt.％； 生根培养基各成分为： 1/2MS培养基、 1.0mg/L  IAA、 0.75mg/L  IAA、 0.1mg/L  NAA、 0.1mg/L ZT； 上述培养基的pH 5.8， 培养温度为25℃， 光照12h， 光照度20 00Lx。 8.根据权利要求1所述利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活率的方法， 其特征在于： 月 季小苗移栽到步骤(2)的栽培基质进行炼苗的温度为20～38℃， 相对湿度为6 0％～99％。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115005076 A 2一种利用AM真 菌提高月季组 培苗炼苗成活率的方 法 技术领域 [0001]本发明属于植物繁育技术领域， 特别是一种利用菌根真菌提高月季组培苗炼苗成 活率的方法。 背景技术 [0002]月季别名长春花、 月月红， 为蔷薇科蔷薇属植物。 中国是月季的原产地， 经过世界 育种家的长期 选育， 逐渐育成具有4万余品种月季。 因花艳丽多彩、 花形优美， 有花中皇后的 美誉。 月季具有丛植、 蔓性、 微型等各种类型， 既可作花境的花边、 片植或丛植， 也可以作地 被、 花架和盆 花摆放， 应用十分广泛。 [0003]月季品种更迭较快， 但目前我国的月季繁育技术还是比较落后， 主要以扦插和嫁 接为主。 扦插多以土壤为培养基， 但是其存在扦插成活率低， 起苗操作困难、 易伤根系， 扦插 密度低造成管理成本高等诸多问题。 嫁接受原材料限制较大， 难以大量快速繁殖。 在实际生 产上， 扦插和嫁接的成活率受到月季类型、 品种、 环境、 技术等因素制约， 对于新优月季品种 的快速推广上， 这些 方法限制了月季新品种的繁 育速度， 不能快速满足市场的需求。 [0004]月季组织培养是简单、 便捷、 快速的繁育技术， 可降低月季生产成本、 提高生产速 度与产品质量。 其中在CN201611105030.4一种月季快速繁殖方法中， 通过外植体的制备、 外 植体的消毒、 诱导培养、 增殖培养、 生根培养过程中培养基的配方和激素配比以及培养过程 中温湿度、 光照的设置， 移栽步骤及基质配比优化， 提高月季的繁殖率， 可以有效提高月季 的繁殖速度实现月季的工厂化育苗， 但操作复杂， 且还需要加入大量激素等， 不利于环境友 好。 CN201410650914.2一种微型月季组培的繁殖方法， 通过精选茎段外植体和优化培养基 的配方， 结合光照等技术， 得到一种增值系数和成活率高的微型月季 组培方法， 其中未额外 关注炼苗环节的成活率。 虽然目前利用组培技术扩繁月季新品种能有效提高繁殖系数和速 度。 但实际生产过程中， 炼苗环节的成活率往往较不稳定。 在 “丛枝菌根真菌对切花月季和 切花菊生长及温度胁迫耐受性的影响， 孔佩佩 ”文章中研究了丛枝菌根真菌能够改善寄主 植物矿质营养， 促进生长发育， 缓解干旱、 盐碱和温度胁迫等多种逆境对植株造成的伤害， 同时也能提高多种抗病虫害能力， 筛选出透光球囊霉、 幼套球囊霉这两种AMF是对切花月季 生长的促进效果最好的菌种， 根内球囊霉是对切 花菊效果最佳的菌种。 而在发明人 的研究 菌根真菌在月季 组培苗炼实验中， 含有的透光球囊霉、 幼套球囊霉的栽培基质， 对提高月季 组培苗炼苗成活率， 数据有提升空间。 [0005]因此， 如何使AM真菌与月季根系形成互惠共生体， 促进根系生长和营养元素吸收， 缩短缓苗期和提高炼苗成活率， 还需要 进一步研究解决。 发明内容 [0006]针对背景技术中的问题， 本发明提供了一种利用AM真菌提高月季组培苗炼苗成活 率的方法。 解决了月季炼苗过程中成活率低的难题， 为植株的存活、 快速复壮和生长提供良 好基础。说　明　书 1/9 页 3 CN 115005076 A 3